
?? 作者:zhuobo?? 發(fā)布時間:2021-07-17 16:59:33?? 瀏覽次數(shù):2
組培儀器廠家格艾特跟大家說離體葉培養(yǎng)包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉的無菌培養(yǎng)。大部分是脫分化后形成愈傷組織,然后再分化出不定芽和不定根。

利用:不僅可以研究形態(tài)構(gòu)建、光合作用、葉綠素形成等問題,還可以作為繁殖名貴植物的有效手段。
葉片培養(yǎng)特點(diǎn):材料來源廣泛,數(shù)量大,易于培養(yǎng),特別是木本植物產(chǎn)生的愈傷組織完整,數(shù)量多,速度快等。
葉再生能力:以羊齒植物最多,其次是雙子葉植物,單子葉植物最少。
再生法:一種是直接誘導(dǎo)不定芽的形成,另一種是先誘導(dǎo)愈傷組織形成愈傷組織,然后由愈傷組織分化為植株。
1.選材和滅菌選用健康潔凈的植株,取其較嫩葉片,沖洗干凈,用70%酒精漂洗約10秒,再用飽和漂白粉液浸泡3~15分鐘,或0.1%升汞浸3~5分鐘,以前者為佳。先用無菌水沖洗幾次,然后放在無菌的干濾紙上吸干水分,以便接種。粗糙或有絨毛的葉片應(yīng)延長消毒時間。小心選擇成熟的葉片。
2.接種把葉片切成0.5 cm見方的小塊或圓片(葉柄和子葉),注意選擇切塊的位置。在 MS培養(yǎng)基中添加 BA 1~3, NAA0.25~1。
3.培養(yǎng)條件為每天10~12小時的光照,光照強(qiáng)度為1500~3000 Lx。
1)培養(yǎng)2-4周后,葉切塊開始變厚、增大,然后形成愈傷組織。2)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基中 BA含量為2左右,大約10天后愈傷組織開始轉(zhuǎn)綠,出現(xiàn)綠色芽點(diǎn),形成不定芽。采用傳代和生根培養(yǎng)方法,完成了整個組培過程。
葉培養(yǎng)比胚、莖尖、莖段培養(yǎng)困難。選擇易培養(yǎng)成功的葉組織,如幼葉比成熟葉容易培養(yǎng),子葉比葉片容易培養(yǎng)。第二,適當(dāng)增加生長素和細(xì)胞分裂素濃度,保證葉片組織的脫分化和再分化。

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